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Identificación de Cryptococcus neoformans var. gattii mediante el uso del medio canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB).
Abstract
Se conocen 2 variedades de Cryptococcus neoformans y 5 serotipos: Cryptococcus neoformans var. neoformans (serotipos A, D y AD), usualmente aislados a partir de muestras clínicas, encontrándose Cryptococcus neoformans var. neoformans serotipo A, con mayor incidencia en pacientes con SIDA; Cryptococcus neoformans var. gattii (serotipos B y C), los cuales son aislados menos frecuentemente, principalmente en pacientes VIH seronegativos y excepcionalmente han sido asociados con SIDA.
... gattii requiere de estudios fisiológicos como pruebas de asimilación y utilización de azucares como el inositol, asimilación de creatinina y la producción de ureasa [51]. Para diferenciar entre las especies de C. neoformans y C. gattii se utiliza principalmente el medio de canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB), dicha prueba se fundamenta en la particularidad que presenta C. gattii de ser resistente a la L-canavanina (aminoácido natural estructuralmente similar a la L-arginina), el cual es degradado por las cepas de esta variedad, liberando amonio como compuesto final [53]. El amonio en el medio eleva el pH del mismo, que pasa de 5,8 a 7 o más, virando el color del medio de amarillo verdoso a un azul de cobalto, por la presencia de azul de bromotimol [53]. ...
... Para diferenciar entre las especies de C. neoformans y C. gattii se utiliza principalmente el medio de canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB), dicha prueba se fundamenta en la particularidad que presenta C. gattii de ser resistente a la L-canavanina (aminoácido natural estructuralmente similar a la L-arginina), el cual es degradado por las cepas de esta variedad, liberando amonio como compuesto final [53]. El amonio en el medio eleva el pH del mismo, que pasa de 5,8 a 7 o más, virando el color del medio de amarillo verdoso a un azul de cobalto, por la presencia de azul de bromotimol [53]. ...
Cryptococcosis is an opportunistic fungal infection of worldwide distribution, mainly produced by the complex Cryptococcus neoformans / Cryptococcus gattii, both are widely distributed in nature, primarily affecting immunocompromised patients. Generally the gateway is through inhalation and later spread to other regions of the body, especially the central nervous system. The diagnosis is performed by direct observation of the fungus, histopathology, culture isolation and the presence of capsular antigen. Cutaneous manifestations may be for primary inoculation to the skin, called primary cutaneous cryptococcosis or for hematogenous spread as part of a systemic disease, which is called secondary cutaneous cryptococcosis. The main differences are a previous trauma, lower percentage of immunocompromised patients and single lesions confined to the hands or bare spots in the first case. Although the incidence of cryptococcosis has decreased with highly active antiretroviral therapy, is still prevalent in regions where there is not access to this treatment, also the skin manifestations are difficult to recognize what is important for the physician to consider this diagnosis in patients with the human immunodeficiency virus or patients with traumatic history exposed to ecology of the fungus as pigeon excreta, soil or decaying wood.
... gattii requiere de estudios fisiológicos como pruebas de asimilación y utilización de azucares como el inositol, asimilación de creatinina y la producción de ureasa [51]. Para diferenciar entre las especies de C. neoformans y C. gattii se utiliza principalmente el medio de canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB), dicha prueba se fundamenta en la particularidad que presenta C. gattii de ser resistente a la L-canavanina (aminoácido natural estructuralmente similar a la L-arginina), el cual es degradado por las cepas de esta variedad, liberando amonio como compuesto final [53]. El amonio en el medio eleva el pH del mismo, que pasa de 5,8 a 7 o más, virando el color del medio de amarillo verdoso a un azul de cobalto, por la presencia de azul de bromotimol [53]. ...
... Para diferenciar entre las especies de C. neoformans y C. gattii se utiliza principalmente el medio de canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB), dicha prueba se fundamenta en la particularidad que presenta C. gattii de ser resistente a la L-canavanina (aminoácido natural estructuralmente similar a la L-arginina), el cual es degradado por las cepas de esta variedad, liberando amonio como compuesto final [53]. El amonio en el medio eleva el pH del mismo, que pasa de 5,8 a 7 o más, virando el color del medio de amarillo verdoso a un azul de cobalto, por la presencia de azul de bromotimol [53]. ...
Cryptococcus neoformans/Cryptococcus gattii son agentes etiológicos de la criptococosis, el primero tiene distribución mundial y su hábitat principal son las excretas de palomas (Columba livia), mientras que el último se ha aislado de árboles y en pocas ocasiones de heces de aves. En este estudio se comparó en condiciones de laboratorio, el crecimiento de C. neoformans y C. gattii en extractos de excretas de paloma. Se utilizaron dos extractos de heces de aves cautivas: uno de una muestra en la que se aisló C. neoformans (extracto positivo) y otro de una muestra negativa para este hongo (extracto negativo), los cuales fueron inoculados con C. neoformans y C. gattii. Los extractos permitieron el desarrollo de las dos especies y, mostraron un patrón de crecimiento uniforme en el extracto negativo, mientras que, en el positivo, el crecimiento de C. neoformans fue mayor comparado con el de C. gattii (P = 0.0001). El crecimiento de C. gattii fue menor a un pH superior a 7,5, mientras que el crecimiento de C. neoformans no mostró diferencias significativas en los dos extractos independiente de las variaciones del pH. Se necesitan más estudios para elucidar la interacción de estas dos especies en las excretas de palomas.
Cryptococcosis is considered a zoonosis but is rare in stock animals. In humans it is imputed to be a mortality cause in immunocompromised patients. This case study reports the anatomopathology of respiratory cryptococcosis in ovine and the recuperation and identification of Cryptococcus neoformans var. neoformans from 1-year frozen lung tissue sample. The findings from haematoxylin/eosin staining microscopy and special staining showed the destruction of the columnar respiratory epithelium architecture associated to suppuration, and the growth of spherical yeast buddings sometimes involved by clear halo produced by unstained capsular substance. The agent was identified by miniApi ID32C, while variety neoformans was further identified by culture in CGB agar. The diagnosis in stock animal suggests the involvement of an exogenous source of the agent as an alert to public health and contributes for epidemiological investigations.
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