Leptospira patógena en murciélagos de Campeche y Yucatán, México

Abstract

Objetivo.
Reportar la infección con Leptospira en riñones de murciélagos de Campeche y Yucatán, México, a través de la amplificación por PCR de dos fragmentos distintos del gen 16S RNA ribosomal.
Materiales y métodos.
Se realizaron capturas en un sitio de Campeche y dos de Yucatán. A los murciélagos capturados se les aplicó la eutanasia y se les realizó una necropsia para recolectar tejido renal que se usó en la extracción de ADN total. Se realizaron dos PCR convencionales para la amplificación de los fragmentos de 16S RNA ribosomal. Se obtuvieron las secuencias de algunos productos positivos y se analizaron con herramientas bioinformáticas para identificar la especie infectante de Leptospira.
Resultados.
Se capturaron 69 murciélagos pertenecientes a cuatro familias y a ocho especies distintas. La familia con mayor diversidad fue Phyllostomidae con cinco especies. La especie con mayor frecuencia de captura fue Artibeusjamaicensis (41, 59.4%). Las PCR arrojaron una frecuencia global de infección de 21.7%. Las especies infectadas fueron A. jamaicensis, Pteronotus parnellii y Chiroderma villosum. El análisis bioinformático arrojó un 99.0% de identidad para Leptospira noguchii, Leptospira borgpetersenii y Leptospira santarosai.
Conclusiones.
Algunas especies de murciélagos de Yucatán y Campeche son portadores renales de leptospiras patógenas, por lo que podrían participar en el ciclo silvestre de transmisión en la región. La frecuencia de infección encontrada en los riñones de los murciélagos utilizados es mayor en comparación con aquellas obtenidas en otros reservorios de Yucatán y Campeche. Nuevas especies de murciélagos son reportadas como portadores de Leptospira para México.

Full text

Como citar (Vancouver).
Torres-Castro M, Febles-Solís V, Hernández-Betancourt S, Noh-Pech H, Estrella E, Peláez-Sánchez R et al. Leptospira patógenas en murciélagos de Campeche y Yucatán,
México. Rev MVZ Cordoba. 2020; 25(2):e1815. https://doi.org/10.21897/rmvz.1815
2020; 25(2):e1815.
Revista MVZ Córdoba
Original
ISSNe: 1909-0544
©El (los) autor (es), Revista MVZ Córdoba 2020. Este artículo se distribuye bajo los términos de la licencia internacional Creative Commons Attribution
4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/), que permite a otros distribuir, remezclar, retocar, y crear a partir de su obra de modo no
comercial, siempre y cuando den crédito y licencien sus nuevas creaciones bajo las mismas condiciones.
https://doi.org/10.21897/rmvz.1815
Leptospira patógena en murciélagos de Campeche y
Yucatán, México
Marco Torres-Castro1* Ph.D; Viviana Febles-Solís1 Biol; Silvia Hernández-Betancourt2 Ph.D;
Henry Noh-Pech1 Ing; Erendira Estrella2 M.Sc; Ronald Peláez-Sánchez3 Ph.D;
Alonso Panti-May2 Ph.D; Belén Herrera-Flores2 M.Sc; Bibiana Reyes-Hernández1 QFB;
Javier Sosa-Escalante4 M.Sc.
1Universidad Autónoma de Yucatán, Centro de Investigaciones Regionales “Dr. Hideyo Noguchi”, Laboratorio de Enfermedades
Emergentes y Reemergentes, Avenida Itzáes x 59, Nro. 490, Mérida, México.
2Universidad Autónoma de Yucatán, Campus de Ciencias Biológicas y Agropecuarias, Departamento de Bioecología Animal,
Km. 15.5 carretera Mérida-X’matkuil, Mérida, México.
3Universidad CES, Escuela de Graduados, Grupo de Investigación en Ciencias Básicas, Calle 10 A Nro. 22–04, Medellín,
Colombia.
4Laboratorio DIMYGEN, Calle 78 Nro. 578, Residencial Pensiones VI, Mérida, México.
*Correspondencia: antonio.torres@correo.uady.mx
Recibido: Septiembre 2019; Aceptado: Febrero 2020; Publicado: Mayo 2020.
RESUMEN
Objetivo. Reportar la infección con Leptospira en riñones de murciélagos de Campeche y Yucatán,
México, a través de la amplicación por PCR de dos fragmentos distintos del gen 16S RNA ribosomal.
Materiales y métodos. Se realizaron capturas en un sitio de Campeche y dos de Yucatán. A los
murciélagos capturados se les aplicó la eutanasia y se les realizó una necropsia para recolectar
tejido renal que se usó en la extracción de ADN total. Se realizaron dos PCR convencionales para
la amplicación de los fragmentos de 16S RNA ribosomal. Se obtuvieron las secuencias de algunos
productos positivos y se analizaron con herramientas bioinformáticas para identicar la especie
infectante de Leptospira. Resultados. Se capturaron 69 murciélagos pertenecientes a cuatro
familias y a ocho especies distintas. La familia con mayor diversidad fue Phyllostomidae con cinco
especies. La especie con mayor frecuencia de captura fue Artibeus jamaicensis (41, 59.4%). Las PCR
arrojaron una frecuencia global de infección de 21.7%. Las especies infectadas fueron A. jamaicensis,
Pteronotus parnellii y Chiroderma villosum. El análisis bioinformático arrojó un 99.0% de identidad
para Leptospira noguchii, Leptospira borgpetersenii y Leptospira santarosai. Conclusiones. Algunas
especies de murciélagos de Yucatán y Campeche son portadores renales de leptospiras patógenas,
por lo que podrían participar en el ciclo silvestre de transmisión en la región. La frecuencia de
infección encontrada en los riñones de los murciélagos utilizados es mayor en comparación con
aquellas obtenidas en otros reservorios de Yucatán y Campeche. Nuevas especies de murciélagos
son reportadas como portadores de Leptospira para México.
Palabras clave: Bacteria, epidemiología, espiroquetas, mamíferos, microbiología, quiróptero
(Fuentes: DeSC, CAB).

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ABSTRACT
Objective. To report the infection with Leptospira in the kidneys of bats from Campeche and Yucatán,
Mexico, through the amplication by PCR of two dierent 16S RNA ribosomal gene fragments.
Materials and methods. Bat captures were carried out at one site in Campeche and two sites in
Yucatán. Euthanasia was applied to the captured bats and a necropsy was performed to collect a
renal tissue sample that was used in the total DNA extraction. Two dierent conventional PCR were
performed for the amplication of the 16S RNA ribosomal gene fragments. Some sequences from
positive products were obtained and analyzed with bioinformatics tools to identify the infectious
species of Leptospira. Results. Sixty-nine bats belonging to four families and eight dierent species
were captured. The family with the greatest diversity was Phyllostomidae with ve species. The most
captured species was Artibeus jamaicensis (41, 59.4%). Both PCR showed a global infection frequency
of 21.7%. The infected species were A. jamaicensis, Pteronotus parnellii, and Chiroderma villosum.
The bioinformatic analysis of the positive products yielded a 99.0% identity for Leptospira noguchii,
Leptospira borgpetersenii, and Leptospira santarosai. Conclusions. Some bat species of Yucatán
and Campeche, Mexico, are renal carriers of pathogenic Leptospira, therefore participating in the
transmission cycle in the region. The frequency of infection found in the renal tissue of the captured
bats is higher than the one obtained from other reservoirs captured in Yucatán and Campeche. New
species of bats are reported as renal Leptospira carriers in Mexico.
Keywords: Bacteria, chiropter, epidemiology, mammals, microbiology, spirochetes (Source: DeSC, CAB).
INTRODUCCIÓN
Leptospira es un género de bacterias espiroquetas,
perteneciente al orden Spirochaetales y a
la familia Leptospiraceae. Según la logenia
más reciente, estas bacterias se dividen en
cuatro subclados (P1,P2,S1 y S2) con diferente
número de especies, de las cuales las patógenas
(subclado P1) ocasionan la leptospirosis en seres
humanos y animales (1). Aunque la leptospirosis
se considera un problema de salud pública en la
población de países en vías de desarrollo, gran
parte de los casos no son diagnosticados, debido
a que los síntomas son poco especícos y porque
la infección generalmente es autolimitante o
tiene un curso subagudo. Sin embargo, algunos
casos pueden ser mortales por las complicaciones
pulmonares o renales (2,3).
Esta enfermedad es una zoonosis endémica
en zonas tropicales y subtropicales de México.
Su incidencia y prevalencia varían de una
región a otra de acuerdo con las características
socioeconómicas como las condiciones de
higiene y sanitización, y ecológicas como la
humedad, temperatura, precipitación pluvial e
inundaciones, que coadyuvan en la dispersión y
supervivencia de Leptospira en el ambiente. En
los estados de Yucatán y Campeche, ubicados
en el sureste de México, se han reportado
diversas tasas de prevalencia o seroprevalencia
por la fuerte inuencia de las características
socioeconómicas y ecológicas previamente
mencionadas (2,3).
Los brotes de leptospirosis humana están
asociados principalmente con la presencia de los
animales reservorios u hospederos accidentales
que excretan leptospiras viables en su orina
(debido a que las bacterias colonizan y se
reproducen en su tejido renal), la cual contamina
el ambiente y los cuerpos naturales (i.e. lagos,
lagunas, ojos de agua, cenotes, ríos, etc.) o
articiales de agua (i.e. cisternas, piscinas,
represas, tanques, etc.). Los roedores Mus
musculus, Rattus rattus y R. norvegicus son los
reservorios más importantes, por lo que han
sido relacionados como la vía de contagio más
relevante en poblaciones humanas de algunas
regiones tropicales (3,4).
Existen evidencias de que los murciélagos
son reservorios de numerosos virus que han
ocasionado epidemias en seres humanos y
animales (5,6). Recientemente, también han
sido involucrados en el ciclo zoonótico de
Leptospira a través de la contaminación del
medio ambiente o de cuerpos articiales de agua
con su orina. No obstante, las pocas hipótesis
sobre los mecanismos de transmisión de las
bacterias excretadas por estos animales a las
poblaciones humanas o de otros animales, aún
son cuestionadas (7,8).
El aumento de los grupos de murciélagos en
zonas habitadas por seres humanos se debe a

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alteraciones severas antropogénicas en su hábitat
natural o en los sitios de descanso, las cuales
facilitan su migración (7). Dichas modicaciones,
asociadas a la falta de depredadores naturales,
contribuyen a que algunos murciélagos
generalistas, habiten y colonicen viviendas o
fábricas abandonadas, generando un mayor
contacto directo o indirecto (por medio de las
excretas) entre ellos y los seres humanos u otros
animales (9), aspecto que incrementa también
la probabilidad de transmisión accidental de
distintos microorganismos patógenos como
Leptospira. Debido a esto, los registros de la
infección con especies patógenas de Leptospira
en murciélagos están incrementándose alrededor
del mundo (8). Sin embargo, en México existe un
único reporte realizado por Ballados-González et
al (10) en el estado de Veracruz, ubicado en el
centro-este del país, en el cual se encontraron
tres especies positivas a la infección: Artibeus
lituratus, Choeroniscus godmani y Desmodus
rotundus.
Conocer las especies de leptospiras patógenas que
infectan las poblaciones de los murciélagos es el
primer paso para evaluar el riesgo de transmisión
a los seres humanos y otros animales (11). En
este contexto, el objetivo de este estudio fue
reportar la infección con Leptospira en riñones
de murciélagos de Campeche y Yucatán, México,
a través de la amplicación de dos fragmentos
distintos del gen 16S RNA ribosomal (16S-rRNA).
MATERIALES Y MÉTODOS
Lineamientos éticos. La extracción de
murciélagos fue aprobada por la Secretaría
de Medio Ambiente y Recursos Naturales
(SEMARNAT) de México (actas: SGPA/
DGVS/03705/17; SGPA/DGVS/01186/17). La
captura, el sacricio y la recolección de muestras
biológicas en los murciélagos estudiados fueron
aprobadas por el Comité de Bioética de la
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
(FMVZ) de la Universidad Autónoma de Yucatán
(UADY) (acta: CB-CCBA-I-2018-001).
Capturas y sitios de estudio. Las capturas
se realizaron como parte de un proyecto cuyo
objetivo era la identicación de especies de
mamíferos silvestres, potenciales reservorios del
virus Ébola en el sureste de México. Por lo tanto,
se decidió trabajar en sitios con fácil acceso y que
contaran con las instalaciones e infraestructura
mínima para montar un laboratorio en la cual
fueron procesados los murciélagos y otros
animales capturados (no incluidos en la presente
investigación).
Las capturas se realizaron en mayo, agosto y
septiembre de 2017 en tres sitios de estudio.
La primera captura se realizó en el Centro de
Estudios para la Conservación e Investigación
de la Vida Silvestre (CECIVS) (19°56’-19°57’ N
y 90°22’’-90°22’ W) ubicado en el municipio de
Hampolol, en el estado de Campeche. Este sitio
tiene un clima cálido subhúmedo, temperatura
media anual de 26.1°C y precipitación pluvial
anual superior a los 1.027 mm. La supercie
forestal está representada por distintos tipos de
selva como: mediana subcaducifolia, mediana
subperennifolia y baja subperennifolia inundable,
vegetación acuática y vegetación secundaria.
Actualmente, esta vegetación presenta cierto
grado de alteración ya que el CECIVS fue parte de
un asentamiento prehispánico y posteriormente
de una hacienda (12).
La segunda captura se realizó en una explotación
pecuaria (21°24’-21°23’ N y 88°30’-88°19’ W)
ubicada en el municipio de Panabá, perteneciente
al estado de Yucatán. Esta zona tiene un clima
cálido subhúmedo con lluvias en verano, una
temperatura media anual de 24 a 26°C y una
cantidad de lluvia durante el invierno que puede
variar entre 600 y 1.500 mm. La vegetación
sobresaliente es la selva baja caducifolia. Sin
embargo, debido a actividades humanas en la
zona (principalmente agropecuarias y agrícolas),
esta ha sido severamente transformada (13).
La tercera captura se realizó en la FMVZ-UADY
(20°49’-20°51’ N y 89°38’-89°39’ W), situada en
el municipio de Mérida, capital de Yucatán. Posee
un clima cálido subhúmedo con lluvias en verano,
una temperatura media anual superior a los 26°C
y una precipitación pluvial anual entre los 675
y 975 mm. La mayor parte de la supercie está
cubierta de vegetación secundaria con diferentes
estadios de regeneración, destacando la de 20 a
30 años (85% de la supercie del total); el resto
(15%) se encuentra repartido en terrenos con
usos agrícolas (milpas, pastizales, henequenales
u otros cultivos) o pecuarios, solares (huertos
familiares) o áreas con algún tipo de construcción
(calles y viviendas) (14).
Procesamiento de murciélagos y toma de
muestras biológicas. En cada sitio se capturó
hasta tres noches consecutivas. Se colocaron
tres redes de niebla (12.0 m x 2.6 m) en lugares
cercanos a reservorios de agua, árboles frutales
y cuevas. Las redes se abrieron durante cinco

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horas (18:00 a 23:00 h), horario en el cual
se observó una mayor actividad de diferentes
grupos de murciélagos, llevándose a cabo las
revisiones cada 20 minutos.
Los murciélagos capturados fueron retirados
de las redes utilizando guantes de carnaza y se
colocaron en bolsas de tela para transportarlos
al laboratorio temporal montado para su
procesamiento dentro de los sitios de estudio.
Todos los ejemplares se identicaron utilizando
claves taxonómicas (15).
A todos los murciélagos se les aplicó la
eutanasia con sobredosis de pentobarbital
sódico vía intraperitoneal, previa anestesia
con isourano, como se describió previamente
(16). Posteriormente, se realizó una necropsia
para recolectar una porción de riñón que
se depositó en viales estériles de 1.5 ml
(Eppendorf®, Alemania), embebida en etanol
absoluto. El personal involucrado en el sacricio
de los animales utilizó doble guante de látex,
mascarilla especializada, bata desechable,
zapatos cerrados, etc., para prevenir el contacto
con la orina, heces, saliva o sangre de los
murciélagos.
Las porciones de riñón se preservaron a
4°C durante su traslado al Laboratorio de
Enfermedades Emergentes y Reemergentes
(LEER) del Centro de Investigaciones Regionales
“Dr. Hideyo Noguchi” (CIR)-UADY, donde
se almacenaron a -80°C hasta su uso en la
extracción de ADN total.
Extracción total de ADN e identicación de
Leptospira. Todos los tejidos fueron lavados
con agua bidestilada durante aproximadamente
cinco minutos para retirar el exceso de alcohol
y afectar lo menos posible la calidad del ADN
extraído.
La extracción de ADN total del tejido renal se
realizó según lo descrito en el kit DNeasy® Blood
& Tissue (QIAGEN®, Alemania), previa digestión
con proteinasa K (Omega Bio-tek® Inc., Estados
Unidos de América [EUA]). Posteriormente, se
cuanticó y evaluó en un espectrofotómetro
(NanoDrop 2000™, Thermo Scientic®, EUA) y
nalmente, se conservó a -70°C hasta su empleo
en la detección molecular.
Para identicar la infección con Leptospira se
ejecutaron dos reacciones en cadena de la
polimerasa (PCR) convencionales, buscando la
amplicación de dos fragmentos distintos del
gen 16S-rRNA.
En la primera se utilizaron los oligonucleótidos
16S3 (5’-ATCCTCATGGCCTTTATGTC-3’) (sentido)
y 16SR (5’-GTCCGCCTACACACCCTTTAC-3’)
(antisentido) previamente descritos (17), los
cuales amplican un segmento de 150 pares de
bases (pb). Las concentraciones nales de los
reactivos, en un volumen nal de 25 μl, fueron:
PCR Buer 1X, 2.5 mM de MgCl2, 0.2 mM de
dNTP’s, 0.2 µM de cada oligonucleótido, 1U de
Taq polimerasa (Thermo Scientic®, EUA) y
cuanto basta para (c.b.p.) de agua grado biología
molecular. Las condiciones empleadas en el
termociclador fueron: desnaturalización inicial a
95°C por cinco minutos, seguido de 34 ciclos con
etapas de 95°C por 30 segundos, 49°C por 30
segundos y 72°C por 30 segundos. La extensión
nal fue a 72°C por cinco minutos.
La segunda PCR se realizó únicamente con las
extracciones positivas a la reacción previa. Los
oligonucleótidos utilizados fueron 16S4 (5’-
AGTGAACGGGATTAGATACC-3’) (sentido) y 16S6
(5’- CCTAGACATAAAGGCCATGA-3’) (antisentido)
(18), los cuales amplican un segmento (diferente
al de la primera reacción) de 440 pb del gen
mencionado. El volumen y las concentraciones
nales de cada reactivo fueron iguales a las de
la primera PCR (150 pb). Las condiciones del
termociclador fueron: desnaturalización inicial a
95°C por cinco minutos, seguido de 34 ciclos con
etapas de 95°C por 30 segundos, 58°C por 30
segundos y 72°C por 30 segundos. La extensión
nal fue a 72°C por cinco minutos.
En todas las reacciones se incluyó un control
positivo (ADN de Leptospira tipicada como L.
interrogans) y control negativo (agua estéril).
La electroforesis se realizó en geles de agarosa
(1%), teñidos con bromuro de etidio. Los
resultados se registraron con un sistema de
foto-documentación (Biorad®, EUA).
Análisis bioinformático. Debido a limitaciones
en el recurso económico, únicamente algunos
productos positivos a la segunda reacción (440
pb) se puricaron con ayuda del kit Gel DNA
Recovery (Zymoclean®, EUA), siguiendo las
instrucciones establecidas por la casa comercial
y se enviaron a secuenciación por el método
de Sanger al laboratorio privado DYMIGEN®
(Mérida, México). Los productos enviados se
seleccionaron según su concentración y pureza,
obtenidas por NanoDrop2000™ (Thermo
Scientic®, EUA).

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Con las secuencias recibidas (en sentidos forward
y reverse) se generó una secuencia consenso
(eliminando los fragmentos correspondientes a
los oligonucleótidos 16S4 y 16S6) con el software
MEGA V7.0® y se analizaron con la herramienta
Basic Local Alignment Search (BLAST), utilizando
el algoritmo Megablast®, ambos desarrollados
por el National Institutes of Health (NIH), con
el objetivo de conocer la identidad y cobertura
de las especies de Leptospira en los murciélagos
infectados.
RESULTADOS
Con un esfuerzo de muestreo de 59 horas/red, se
capturaron un total de 69 murciélagos repartidos
en cuatro familias: Noctilionidae, Mormoopidae,
Phyllostomidae y Vespertilionidae, y ocho
especies: Noctilio leporinus, Pteronotus parnellii,
Glossophaga soricina, Carollia sowelli, Artibeus
jamaicensis, A. lituratus, Chiroderma villosum y
Rhogeessa aeneus. Cinco especies capturadas
pertenecieron a la familia Phyllostomidae.
Artibeus jamaicensis fue la especie con el mayor
porcentaje de ejemplares capturados (59.4%,
41/69). El sitio con el mayor porcentaje de
capturas fue el CECIVS (36.2%, 25/69), siendo
también el que contó con el mayor número
de especies y familias capturadas (Tabla 1).
Respecto a los hábitos alimenticios se capturaron
especies piscívoras, frugívoras, frugívoras/
nectarívoras e insectívoras.
La PCR para la detección del gen 16S-rRNA arrojó
una frecuencia global de infección de 21.7%
(15/69). De los ejemplares infectados, 11 fueron
A. jamaicensis (73.4%), dos P. parnellii (13.3%)
y dos C. villosum (13.3%).
En cada sitio de estudio se identicó por lo menos
un individuo infectado, siendo la FMVZ en el que
mayor número se obtuvo con ocho especímenes
(53.3%, 8/15), todos pertenecientes a la especie
A. jamaicensis. Los ejemplares infectados de
P. parnellii y C. villosum fueron capturados
en el CECIVS y Panabá, respectivamente. La
información correspondiente únicamente a los
murciélagos positivos a la infección se presenta
en la tabla 2.
Tabla 2. Sitio de estudio, especie, número total de
individuos capturados por especie y de
individuos positivos por especie a la infección
con Leptospira en los murciélagos estudiados
de Campeche y Yucatán, México.
Sitio de
estudio Especie #ICE #IPE
CECIVS Pteronotus parnellii 6 2 (33.3)
Artibeus jamaicensis 7 2 (28.6)
Panabá Chiroderma villosum 5 2 (40.0)
Artibeus jamaicensis 12 1 (8.33)
FMVZ Artibeus jamaicensis 22 8 (36.4)
#ICE: Número total de individuos capturados por especie.
#IPE: Número de individuos positivos por especie (%)
El análisis bioinformático arrojó un 99.0%
de identidad y cobertura para las especies
patógenas Leptospira noguchii, L. borgpetersenii
y L. santarosai para los productos positivos de
los murciélagos P. parnellii y C. villosum, siendo
L. borgpetersenii la única especie identicada
en ambos (Tabla 3). El número de pb que se
utilizaron al momento de brindar estos valores
de identidad fue de 440.
Tabla 1. Familia, especie y número de murciélagos capturados para cada sitio de estudio en Campeche (CECIVS) y Yucatán
(Panabá y FMVZ).
Familia Especie
Individuos capturados por sitio de estudio Total de individuos
capturados (%)
Campeche Yucatán
CECIVS Panabá FMVZ
Noctilionidae Noctilio leporinus 6 0 0 6 (8.7)
Mormoopidae Pteronotus parnellii 6 0 0 6 (8.7)
Phyllostomidae Glossophaga soricina 1 3 0 4 (5.8)
Carollia sowelli 2 0 0 2 (2.9)
Artibeus lituratus 1 1 0 2 (2.9)
Artibeus jamaicensis 712 22 41 (59.4)
Chiroderma villosum 1 5 0 6 (8.7)
Vespertilionidae Rhogeessa aeneus 1 1 0 2 (2.9)
Total (%): 25 (36.2) 22 (31.9) 22 (31.9) 69 (100)

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Tabla 3. Especie de murciélago, sitio de estudio,
especie de Leptospira, número de acceso
de GenBank de la secuencia homóloga
y resultados de análisis BLAST, de los
productos de PCR positivos al gen 16S-rRNA
de Leptospira.
Especie de
murciélago Sitio de
estudio Especie de
Leptospira #AG AIC
Pteronotus
parnellii CECIVS
Santarosai CP028377.1 99.0
Borgpetersenii MH059524.1 99.0
Chiroderma
villosum Panabá
Borgpetersenii AY995713.1 99.0
Noguchii EU349495.1 99.0
#AG: Número de acceso GenBank de la secuencia homóloga;
AIC: Análisis BLAST (%), identidad y cobertura
DISCUSIÓN
Los murciélagos de la península de Yucatán han
sido identicados como reservorios de distintos
virus del género Flavivirus (6) y como hospederos
accidentales de los protozoarios Toxoplasma
gondii (16) y Trypanosoma cruzi (19,20), por
lo que este estudio aumenta el conocimiento
sobre la participación de estos mamíferos en
el ciclo epidemiológico de agentes infecciosos
emergentes o reemergentes, señalados en la
región con relevancia en salud pública y animal,
como lo es Leptospira (21).
En Yucatán, la infección con leptospiras patógenas
ha sido descrita en riñones de roedores
capturados en ambientes peridomésticos y
silvestres (17,22,23,24), mientras que, en
Campeche la infección ha sido detectada en
roedores silvestres (25), por lo que los presentes
hallazgos son los primeros en murciélagos de
Yucatán y Campeche, México.
El establecimiento y la colonización de Leptospira
en el tejido renal de los reservorios animales,
han sido relacionados con el aumento de
casos nuevos y en la generación de brotes de
leptospirosis en seres humanos o animales
domésticos (hospederos susceptibles) de
algunas regiones endémicas tropicales, debido
a la excreción y dispersión de bacterias por su
orina y la subsecuente contaminación ambiental
o de cuerpos naturales de agua en donde las
bacterias sobreviven y se mantienen infectivas
por periodos variables (3,4,26).
Interesantemente, la frecuencia de infección
encontrada en el tejido renal de los murciélagos
utilizados en este trabajo (21.7%), es más
elevada en comparación con las obtenidas en
tejido renal de otros reservorios capturados en
Yucatán como ratones (1.5%, 2/130) (17), ratas
(1.4%, 1/73) (23) y roedores silvestres (4.5%,
1/22) (24) y también en roedores silvestres
capturados en Campeche (20%, 2/10) (25),
lo cual posiblemente esté relacionado con un
contacto mayor y frecuente entre los murciélagos
y las leptospiras que permanecen infectivas en
el ambiente húmedo en los que estos animales
suelen vivir, descansar o transitar (27). Sin
embargo, son necesarias investigaciones
epidemiológicas para conrmar esta hipótesis.
Por otra parte, esta misma frecuencia de infección
es menor en comparación con la reportada
previamente por Ballados-González et al. (10)
en murciélagos de Veracruz, México (30.9%,
25/81). También es menor en comparación con
estudios realizados en murciélagos de otros
países del continente americano como Colombia
(26.9%, 7/26) (28) y Brasil (39.1%, 36/92)
(29), pero es mayor en comparación con las
investigaciones en murciélagos de Argentina
(2%, 14/70) (30), Perú (3.4%, 20/2,237) (31)
y otra de Brasil (2%, 6/343) (32). Todos estos
hallazgos muestran variaciones amplias en las
frecuencias de infección con Leptospira en este
grupo de mamíferos (28).
Aunque se conocen diversos estudios que han
identicado leptospiras patógenas en murciélagos
alrededor del mundo, existe controversia sobre su
participación en el ciclo de transmisión zoonótico
de estas bacterias y la consecuente presentación
de la enfermedad (8,27). No obstante, debido a
los severos y numerosos cambios antropogénicos
(principalmente en el uso de suelo), la capacidad
de movilidad de los quirópteros y los elevados
números de sus poblaciones, la probabilidad
de contacto entre estos animales y los seres
humanos se ha incrementado, junto con el riesgo
de transmisión de leptospiras patógenas (28,32).
Se han formulado algunas hipótesis sobre los
mecanismos de transmisión de Leptospira en los
murciélagos, independientemente de sus hábitos
alimenticios. Una de ellas es el contacto con orina
de otros individuos portadores pertenecientes
a la misma colonia o grupo, debido al marcado
comportamiento gregario que permite que
murciélagos de distintas especies o de una sola
especie coexistan en un mismo hábitat (8),
aunado a la conducta de acicalamiento que
propicia la ingesta accidental de restos (gotas)

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de orina presentes en el cuerpo o en las alas
(33). De la misma manera, el consumo de agua
en cuerpos naturales o articiales contaminados
con leptospiras viables puede ser otra vía de
transmisión, como sucede habitualmente con
otro tipo de mamíferos (26), lo cual puede
explicar la diversidad de especies de murciélagos
infectados (al beber de una misma fuente de
agua contaminada), así como las prevalencias
elevadas y las distintas especies de leptospiras
que infectan a estos animales (9). Por último, el
contacto indirecto con suelo húmedo contaminado
con leptospiras viables, también ha sido sugerido
como un posible mecanismo de transmisión
(29), sobre todo en especies que consumen
insectos con restos de sustrato en su cuerpo o
extremidades (34).
El presente estudio permitió conocer que un
mayor número de especies de murciélagos
son portadoras de Leptospira en México, al
identicarse la infección en P. parnellii y C.
villosum. Anteriormente, Ballados-González et
al (10) reportaron la infección en A. lituratus,
C. godmani y D. rotundus.
Artibeus jamaicensis es la única especie positiva
para Yucatán y Campeche que previamente ha
sido descrita como infectada con Leptospira para
el continente americano en la isla de Trinidad (35).
Con relación a las especies patógenas de
Leptospira, Ballados-González et al (10)
describieron la infección con L. noguchii,
L. weilii y L. interrogans, por lo que, según
estos registros, esta investigación reporta por
primera vez la infección con L. borgpetersenii
y L. santarosai en murciélagos de México.
Leptospira noguchii es la única especie localizada
en murciélagos de los tres estados (Veracruz,
Campeche y Yucatán). Asimismo, con referencia
a las leptospiras patógenas reportadas en
los trabajos realizados en murciélagos del
continente americano (28,29,30,31,32,35),
esta investigación identica por primera vez la
infección con L. santarosai, lo cual también es
probable a nivel mundial (8,9).
Otro de los aportes de este estudio, es el
incremento en la diversidad de especies
patógenas de Leptospira (borgpetersenii,
santarosai y noguchii) en portadores renales de
Yucatán y Campeche, ya que previamente se han
descrito L. interrogans en ratones sinantrópicos
(M. musculus) y silvestres como Heteromys
gaumeri y Ototylomys phyllotis (17,23,24) y
Leptospira kirschneri en R. rattus (17).
Desafortunadamente, los productos positivos
de A. jamaicensis (que fue la especie con el
mayor número de captura y positivos a la
infección en el presente trabajo) no pudieron ser
enviados a secuenciación y analizados, lo cual
signica una limitación en los resultados, ya que
probablemente estos individuos estén infectados
con otras especies de Leptospira prevalentes en
la región. Por este motivo, es necesario realizar
una nueva captura para determinar el valor
epidemiológico de esta especie particular en la
transmisión de Leptospira en la región.
La presencia de murciélagos portadores renales
de Leptospira puede tener implicaciones en la
salud pública. Vashi et al (7) describieron un caso
de leptospirosis en una persona adulta, adquirida
por contacto indirecto con un murciélago que
probablemente contaminó con orina un cuerpo
articial de agua. Considerando lo anterior y las
características del CECIVS como lo son los extensos
cuerpos naturales de agua con acceso al público,
esta vía de transmisión podría presentarse en los
usuarios al infectarse con bacterias contenidas
en el agua excretadas por murciélagos (36). Por
otra parte, teniendo en cuenta que dos de las
especies de murciélagos generalistas (adaptadas
a las viviendas y otras construcciones) capturadas
en Yucatán y Campeche, fueron positivas a la
infección con Leptospira, el riesgo de transmisión
a personas y animales domésticos por contacto
con su orina puede incrementarse (30,32). En
este sentido, la especie A. jamaicensis ya ha sido
identicada en los peridomicilios de viviendas
rurales de Yucatán (19).
Por otro lado, la transmisión indirecta a los
seres humanos y animales domésticos de las
leptospiras que infectan a los murciélagos puede
ocurrir por la participación de otros reservorios,
particularmente aquellos que habitan en los
mismos hábitats y se alimentan en el suelo,
tales como ratones (M. musculus) o ratas (R.
rattus) (11,31); los cuales han sido reconocidos
en el interior o en los alrededores próximos de
viviendas rurales y suburbanas de Yucatán (23).
Conicto de intereses
Los autores del presente trabajo declaramos que
no existe conicto de intereses.
Agradecimientos
A Yessica Gurubel, Emir Palomo y Naomi
Cuevas, por su apoyo en la captura. A Irene
Castillo Rivas por la traducción del resumen. El
trabajo de campo fue nanciado por el proyecto
“Análisis y evaluación de los probables vectores
y reservorios del virus del Ébola en México”,
CONACYT-251053, apoyado por el Fondo
Sectorial de Investigación para la Educación.
El trabajo de laboratorio fue nanciado por el
Laboratorio de Enfermedades Emergentes y
Reemergentes del CIR, UADY.

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